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耗材专区 | 肽段脱盐耗材合集
耗材专区 | 肽段脱盐耗材合集
更新时间:2024-12-27 点击次数:116
01
简介
2019年初,KOK中欧体育登录从3M公司购得Empore™品牌所有资产和技术工艺。为了满足生命科学领域的应用需求,我们基于Empore™固相萃取膜技术,开发出多款用于蛋白质组学领域样品前处理的肽段脱盐产品,主要有:Empore™固相萃取盘、Empore™固相萃取吸头、Empore™
固相萃取柱
、Empore™固相萃取离心管、Empore™固相萃取96孔板等。每一款产品都有多种填料类型(C18、C8、SDB-XC、SDB-RPS、Anion、Cation等)、多种规格,可以根据要处理的样品种类、样品量多少、所需的通量多少等因素去选择。这些耗材可以在LC-MS/MS分析之前纯化多肽样品或对多肽样品做脱盐处理。
02
产品信息
03
通用脱盐方案
A
试剂耗材
(1)C18 StageTips(货号:98-0604-1001-3EA)
(2)Tips离心适配器(货号:70-2019-1023-7)
(3)离心管:1.5 mL或2.0 mL,低吸附
(4)试剂:
活化液:100%甲醇
淋洗/
平衡液
:0.5%乙酸水溶液
洗脱液I:0.5%乙酸/60%乙腈水溶液(0.5%乙酸:60%乙腈:40%水)
洗脱液II:0.5%乙酸/80%乙腈水溶液(0.5%乙酸:80%乙腈:20%水)
B
实验步骤
(1)样品预处理:用200 µL淋洗/平衡液(0.5%乙酸水溶液)溶液多肽样品,涡旋10~15 min,13000 r/min离心3~5 min;
(2)将固相萃取吸头与适配器组装在一起,然后整体放入2 mL离心管中,并在这一步做好标记;
(3)活化I:加载200 μL甲醇,4000 r/min离心1~2 min;
(4)活化II:加载200 µL 80% ACN / 0.5% HAc, 4000 r/min离心1~2 min;
(5)弃去离心管中的液体;
(6)平衡:加载200µL0.5%乙酸水溶液, 4000 r/min离心1~2 min;
(7)弃去离心管中的液体;
(8)上样:在吸头中加载200 µL样品,4000 r/min离心1~2 min,收集流出液并重新加载到吸头上,再次离心,重复此步骤三次;根据含盐量的不同,可调整离心时间(2~5 min);
(9)淋洗:加载200 µL0.5%乙酸水溶液,4000 r/min离心2~3 min,重复此步骤2~3次;同样,根据含盐量的不同,可调整离心时间(2~4 min);
(10)把吸头和适配器放入新的离心管中,重新做好标记;
(11)洗脱I:加载200 µL 60% ACN / 0.5% HAc水溶液,4000 r/min离心2min;
(12)洗脱II: 加载200 µL 80% ACN / 0.5% HAc水溶液,4000 r/min离心2min,重复此步骤一次;
(13)弃去吸头,在干冰上快速冷冻样品(5~10 min),并进行真空干燥。
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